流式细胞术实验常见问题

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1. 阳性细胞没有或比例少：检查抗体荧光是否淬灭，抗体结合条件是否恰当，尽量选择新鲜的标本和细胞，如果是细胞内的抗原要做破膜处理等。

2. 如何排查干扰因素：细胞要新鲜，尽量把培养基洗掉，减少细胞碎片和培养基的高背景影响；多色流式要进行合适的荧光补偿（自动补偿和手动补偿）；尽量选择直标抗体，选择合适的抗体稀释度，排除非特异性等。
3. 抗体与抗原结合不好：检查抗体活性，选择构象较小的荧光素，如FITC，防止空间结构阻碍抗体和抗原结合等。