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实验动画视频:Biorbyt CD133抗体(PROM1)及研究应用
CD133(PROM1,Prominin-1)是一种细胞膜相关糖蛋白,也是干细胞、祖细胞和肿瘤生物学研究中常见的细胞表面标志物。CD133经常用于研究特定干/祖细胞群体、肿瘤细胞异质性以及具有干细胞样特征的细胞群体。
在实验研究中,CD133可以通过免疫组织化学(IHC)、Western blot(WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)、ELISA以及Flow Cytometry等不同技术进行检测。但不同CD133抗体的Clone、免疫原、识别表位和验证应用并不相同,因此应根据具体实验选择产品。
本期实验动画视频介绍Biorbyt CD133抗体及其研究应用,并帮助科研人员了解CD133是什么、PROM1与CD133的关系、CD133为什么常用于干细胞和肿瘤研究,以及如何选择适合自己实验的CD133抗体。
CD133是什么?
CD133又称PROM1(Prominin-1),是一个跨膜糖蛋白。它最初因与造血干细胞和祖细胞研究相关而受到关注,随后被广泛应用于神经干细胞、其他组织祖细胞以及肿瘤研究。
在许多研究中,科研人员利用CD133抗体识别和分析具有特定表型的细胞群体,并进一步结合其他细胞标记物研究细胞的分化、增殖、迁移和功能状态。
CD133和PROM1是什么关系?
在文献、数据库和抗体产品页面中,经常会同时看到CD133、PROM1、Prominin-1和AC133等名称。
PROM1是编码Prominin-1蛋白的基因名称,而CD133是该蛋白广泛使用的CD命名。因此在搜索文献、数据库或抗体时,可以同时使用“CD133”和“PROM1”作为关键词。
不过,AC133在历史抗体研究中也与特定表位识别相关,因此实际进行抗体比较时,不能只因为产品名称中都写着“CD133”就假定不同抗体识别完全相同的表位。
CD133为什么常用于干细胞研究?
CD133长期应用于多种干细胞和祖细胞群体研究,包括造血、神经以及其他组织相关细胞。
在实际实验中,CD133可以作为细胞表型的一部分,与其他Marker组合用于:
- 识别和研究特定干细胞或祖细胞群体;
- 分析细胞分化过程中CD133表达变化;
- 比较CD133阳性与CD133阴性细胞的生物学特征;
- 研究干细胞相关信号通路;
- 结合细胞分选进行后续培养或功能实验;
- 研究组织发育和再生过程中的细胞异质性。
CD133为什么经常用于肿瘤干细胞研究?
肿瘤干细胞(Cancer Stem Cell,CSC)研究关注肿瘤内部具有不同增殖、分化、耐药和肿瘤形成潜能的细胞亚群。
CD133在多种肿瘤研究中被用于划分和研究不同细胞群体,因此成为癌症干细胞研究领域最常见的候选Marker之一。
研究人员可能将CD133与CD44、ALDH相关指标、EpCAM或其他Marker联合使用,再通过细胞分选、球形成、克隆形成、移植模型或其他功能实验进一步研究细胞的干细胞样特征。
Biorbyt CD133明星抗体:orb99113
对需要进行CD133组织、细胞及蛋白表达研究的用户,可以直接查看Biorbyt的CD133 Rabbit Polyclonal Antibody(orb99113)。
Target:CD133 / PROM1
Host:Rabbit
Clonality:Polyclonal
Reactivity:Human、Mouse、Rat
Tested Applications:ELISA、ICC、IF、IHC-P、WB
适合需要从组织染色、细胞免疫荧光以及Western blot等多个实验维度研究CD133/PROM1的科研项目。
CD133抗体可以用于哪些实验?
1. 免疫组织化学(IHC)
IHC适合研究CD133在组织中的表达和空间分布,可以观察哪些细胞区域出现CD133相关信号,并将蛋白表达与组织形态联系起来。
对石蜡组织进行研究时,应优先选择具有IHC-P验证的CD133抗体,并根据抗体说明优化固定、抗原修复、抗体浓度和显色条件。
2. Western blot(WB)
Western blot可以用于比较不同细胞或组织样本中的CD133蛋白表达情况。
CD133属于糖蛋白,实际WB中的迁移行为可能受到糖基化、样本处理及蛋白状态影响,因此不要仅依据一个理论分子量位置判断条带是否正确。
3. 免疫荧光(IF)和ICC
IF和ICC可以用于观察CD133在细胞中的定位和不同细胞之间的表达差异,并可与其他Marker进行多重荧光分析。
多色实验还需要考虑一抗宿主、二抗交叉反应、荧光染料光谱以及不同Marker之间的共表达情况。
4. Flow Cytometry
流式细胞术可以在单细胞水平分析CD133阳性和阴性群体,也可以与CD44、CD34、EpCAM或其他Marker组合建立多参数Panel。
不过,用于Flow Cytometry的抗体应具有相应的FC验证,尤其是进行活细胞表面染色时,还需要关注抗体是否能够识别天然状态下可接近的胞外表位。
orb99113适合Flow Cytometry吗?
如果实验目的主要是IHC-P、WB、IF、ICC或ELISA,orb99113具有相应的产品验证信息。
如果实验核心需求是Flow Cytometry,建议选择明确具有FC验证的CD133抗体,而不是仅因为Target相同就直接使用未标注FC验证的产品。
如果研究重点是CD133流式检测,可以查看Biorbyt orb526485。该产品具有FC和WB应用验证,适用于Human和Mouse样本。
查看orb526485产品详情对需要Human CD133单克隆抗体并进行FC或WB实验的研究,也可以查看orb1312499,根据实验目的和Clone要求进一步比较。
查看orb1312499产品详情多克隆和单克隆CD133抗体怎么选?
多克隆CD133抗体
多克隆抗体能够识别目标抗原上的多个表位,在某些WB、IHC和IF实验中具有良好的信号表现。
例如orb99113属于Rabbit Polyclonal CD133 Antibody,适合ELISA、ICC、IF、IHC-P及WB等研究应用。
单克隆CD133抗体
单克隆抗体来源于特定Clone,识别相对明确的抗原表位,因此在需要Clone一致性或特定表位识别的研究中具有优势。
但“单克隆”本身并不意味着一定比多克隆抗体更适合所有实验。最终仍应根据实际验证应用、物种和样本条件选择。
为什么不同CD133抗体结果可能不同?
即使两支抗体都标注为“CD133 antibody”,实验结果仍可能存在明显差异。
原因可能包括:
- 识别表位不同: 不同Clone或不同免疫原产生的抗体可能识别CD133不同区域。
- 蛋白构象不同: WB中的变性蛋白与活细胞表面的天然蛋白结构不同。
- 糖基化状态: CD133的糖基化可能影响部分表位的暴露和抗体识别。
- 固定方式: IHC和IF中的固定条件可能改变抗原表位。
- 样本表达量: 不同细胞、组织和疾病模型中的CD133表达可能明显不同。
- 抗体应用验证不同: WB有效的抗体不能自动认为也适合活细胞Flow Cytometry。
CD133抗体如何用于IHC?
使用CD133抗体进行IHC时,需要从抗体本身、组织类型和实验条件三个方面判断结果。
建议重点确认:
- 产品是否具有IHC-P或相应IHC验证;
- 实验物种是否与抗体Reactivity匹配;
- 固定时间是否合适;
- 是否需要进行抗原修复;
- 抗体稀释比例是否经过优化;
- 是否具有已知阳性组织作为对照;
- 阴性对照能否排除非特异性背景。
orb99113具有IHC-P应用验证,因此如果实验目标是石蜡组织CD133染色,可以直接进入产品页查看当前实验数据和使用说明。
用于CD133/PROM1相关IHC-P、WB、IF、ICC和ELISA研究。购买或正式实验前建议根据产品页当前Datasheet确认最新规格和实验条件。
CD133做Western blot时为什么可能出现不同分子量?
对膜糖蛋白进行WB时,理论蛋白质量与实验观察到的表观分子量并不一定完全一致。
CD133本身具有糖基化等修饰,因此蛋白迁移情况可能受到以下因素影响:
- 糖基化状态;
- 不同蛋白形式;
- 样本来源;
- 蛋白变性条件;
- 凝胶体系;
- 抗体实际识别区域。
因此,判断CD133 WB条带时应结合抗体产品验证图、阳性样本以及其他实验信息,而不是只根据一个固定理论分子量判断。
CD133和CD44有什么区别?
CD133和CD44都是肿瘤和干细胞相关研究中经常出现的细胞表面Marker,但它们是完全不同的蛋白。
在部分肿瘤研究中,科研人员会同时使用CD133和CD44研究不同细胞亚群。但具体组合应根据癌种和研究问题确定。
CD133阳性、CD44阳性或双阳性群体是否具有更强的肿瘤干细胞样功能,仍需要通过功能实验进行验证。
CD133和CD34有什么区别?
CD133和CD34都与造血干细胞和祖细胞研究有关,但属于不同的细胞表面分子。
在某些造血细胞研究中,可以根据CD34和CD133的组合表达进一步分析不同发育或分化阶段的细胞群体。
实际Panel还需要结合CD45、谱系Marker以及其他实验指标进行设计,不能仅依赖CD133或CD34一个指标判断细胞身份。
如何选择适合实验的CD133抗体?
选择CD133抗体时,可以优先按照以下顺序确认:
- 实验应用: 首先确定需要WB、IHC、IF、ICC还是Flow Cytometry。
- 物种: 确认Human、Mouse、Rat或实际研究物种。
- 单克隆或多克隆: 根据实验目的判断是否需要特定Clone。
- 表位和免疫原: 对天然表面蛋白、固定组织和变性蛋白的检测要求可能不同。
- 实验验证: 优先选择有与自身实验应用匹配的验证图片和数据的产品。
- 荧光标记: 多色IF或Flow Cytometry需要进一步考虑FITC、PE、APC等荧光标记方案。
- 阳性对照: 根据产品验证和文献选择合适的组织或细胞样本。
CD133抗体常见问题
CD133和PROM1是一个蛋白吗?
是。PROM1编码Prominin-1蛋白,CD133是该蛋白广泛使用的CD名称。因此搜索抗体和文献时通常可以同时使用CD133和PROM1。
CD133是肿瘤干细胞特异性Marker吗?
不能简单这样定义。CD133广泛用于肿瘤干细胞相关研究,但也表达于其他干细胞、祖细胞以及部分分化细胞。是否具有肿瘤干细胞样功能需要结合具体模型和功能实验验证。
CD133抗体可以做IHC吗?
可以,但需要选择具有对应IHC验证的产品。例如Biorbyt orb99113具有IHC-P应用验证,可根据当前产品Datasheet进一步确认实验条件。
CD133抗体可以做Western blot吗?
可以,许多CD133抗体具有WB验证。但CD133属于糖蛋白,实际观察到的迁移位置可能受到糖基化和样本状态影响,因此应结合产品验证图和阳性对照判断。
orb99113可以做Flow Cytometry吗?
当前orb99113产品页列出的验证应用主要包括ELISA、ICC、IF、IHC-P和WB。如果实验重点是Flow Cytometry,建议选择明确具有FC验证的CD133产品,例如orb526485等,并根据样本和实验方案进一步确认。
CD133阳性就是干细胞吗?
不是。CD133可以作为某些干细胞或祖细胞研究中的Marker,但单一表面标志物不足以证明一个细胞具有真正的自我更新和多向分化能力。
为什么不同CD133抗体染色结果不一样?
不同抗体可能识别不同表位,并受到蛋白构象、糖基化、固定方式和样本处理等因素影响。因此比较抗体时应同时查看Clone、免疫原、实验应用和验证数据。
CD133可以和CD44一起检测吗?
可以。在部分肿瘤和细胞异质性研究中,CD133和CD44会被联合检测。但Marker组合应根据具体癌种和实验问题设计,双阳性表型本身不能代替功能验证。
总结
CD133(PROM1/Prominin-1)是干细胞、祖细胞和肿瘤生物学研究中常用的细胞表面标志物,并广泛应用于细胞异质性和肿瘤干细胞相关研究。
CD133可以通过IHC、WB、IF、ICC和Flow Cytometry等多种技术研究,但不同抗体适用范围并不完全相同。因此选择产品时应重点考虑实验应用、物种、Clone、免疫原、表位以及实际验证数据。
对需要进行IHC-P、WB、IF、ICC和ELISA研究的用户,可以直接查看Biorbyt CD133 Rabbit Polyclonal Antibody orb99113;对于Flow Cytometry,则建议选择具有明确FC验证的CD133抗体。
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根据IHC、WB、IF、ICC或Flow Cytometry实验需求选择CD133抗体,或联系Biorbyt技术支持协助确认物种、应用、Clone和标记方式。